Прямая детекция антител к Yersinia pestis с использованием стеклянных микроструктурных волноводов как экспресс-метод оценки сероконверсии у привитых против чумы лиц

Актуальность. В рамках обеспечения санитарно­-эпидемиологического благополучия на территории природных очагов чумы Российской Федерации по эпидемиологическим показаниям проводится вакцинация населения против этой инфекции. Отсутствие единой схемы оценки эффективности вакцинации диктует необходимость разработки универсальных экспресс­-методов, позволяющих проводить скрининговые исследования противочумного иммунитета, в том числе в полевых условиях.

Цель. Оценить эффективность экспресс­-метода прямой детекции антител к Yersinia pestis в биологическом материале с использованием стеклянных микроструктурных волноводов с полой сердцевиной (СМВ ПС) в качестве иммуносенсоров при изучении динамики сероконверсии у привитых вакциной чумной живой людей.

Материалы и методы. В исследовании взяты образцы сыворотки крови от 30 лиц, привитых по эпидемическим показаниям вакциной чумной живой (ВЧЖ), от 30 добровольцев, не вакцинированных и не имеющих контакта с возбудителем чумы в анамнезе. Выявление специфических антител к капсульному антигену (F1) чумного микроба в сыворотках проводили параллельно методом ИФА и с применением оптических иммуносенсоров, полученных путем введения реакционной смеси специфического антигена F1 с анализируемым образцом сыворотки крови в структурную оболочку СМВ ПС.

Результаты и обсуждение. Проведена оценка возможности использования метода прямой детекции антител с помощью СМВ ПС в разные временные интервалы согласно получению сывороток крови в рамках мониторинга за вакцинированными лицами из числа жителей Прикаспийского песчаного природного очага чумы. Выявлено наличие специфических антител к белку F1 в сыворотке крови привитых волонтеров как с помощью ИФА, так и с применением СМВ ПС. Отмечена быстрота способа прямой детекции АТ (максимум 2 минуты на один тест), отсутствие необходимости применения видоспецифичных вторичных антител, ферментов и субстратов и дополнительных затрат на трудоёмкую пробоподготовку.

Заключение. Метод прямой детекции антител с использованием стеклянных микроструктурных волноводов является перспективным для внедрения в перечень экспресс-­методов оценки иммунологической эффективности противочумной вакцинации.

1. Коновалова О. А., Анчикова Л. И., Нагулин К. Ю. и др. Способ определения аутоантител и способ диагностики аутоиммунного тиреоидита. Патент РФ на изобретение № 2315313. 20.01.2008. Бюл. №2. Доступно на: https://www.fips.ru/cdfi/fips.dll/ru?ty=29&docid=2315313 Ссылка активна на 16 декабря 2022 г.

2. Кудрявцева О. М., Кожевников В.А., Бугоркова С.А. и др. Способ детекции антител в биоматериале с использованием стеклянных микроструктурных волноводов. Патент РФ на изобретение № 2753856. 24.08.2021. Бюл. № 24. Доступно на: https://www.fips.ru/cdfi/fips.dll/ru?ty=29&docid=2753856 Ссылка активна на 16 декабря 2022 г.

3. Титенко М. М., Вейнблат В. И., Веренков М. С. и др. Препаративный метод выделения и очистки капсульного антигена возбудителя чумы при помощи изоэлектрической преципитации. В сб.: Диагностика и профилактика особо опасных инфекций. Саратов: Коммунист; 1983. С. 34–39.

4. Скибина Ю. С., Гюнтер Ш. Чипированный микроструктурный волновод и способ его изготовления. Патент РФ на изобретение № 2606796. 10.01.2017. Бюл. № 1. Доступно на: https://www.fips.ru/cdfi/fips.dll/ru?ty=29&docid=2606796 Ссылка активна на 16 декабря 2022 г.

5. Бугоркова С. А., Клюева С. Н., Кудрявцева О. М. и др. Иммунологический мониторинг вакцинированных против чумы в Прикаспийском песчаном природном очаге для оценки и управления рисками здоровью населения. Анализ риска здоровью. 2020. № 4. С.121–129.

6. Корытов К. М., Войткова В. В., Дубровина В. И. и др. Оценка эффективности вакцинации населения против чумы в Тувинском природном очаге // Acta biomedica scientifica. 2019. Т. 4, №5. С. 31–37.

7. Кудрявцева О. М., Гончарова А. Ю., Бугоркова С. А. и др. Анализ факторов, влияющих на иммунологическую реактивность лиц, вакцинированных живой чумной вакциной. Здоровье населения и среда обитания. 2020. № 6 (327). С. 17–24.

8. Иммунологические методы. Фримель Г., ред. М.: Медицина; 1987

9. Chanteau S., Rahalison L., Ratsitorahina M., et al. Early diagnosis of bubonic plague using F1 antigen capture ELISA assay and rapid immunogold dipstick. Int J Med Microbiol. 2000. Vol. 290, N 3. P. 279–283.

10. Sagiyev Z., Berdibekov A., Bolger T., et al. Human response to live plague vaccine EV, Almaty region, Kazakhstan, 2014–2015. PLoS ONE. – 2019. – Vol. 14, № 6. e0218366.